目前我國多采用凱氏定氮法檢測蛋白質(zhì),此法由人工操作,比較費時,檢測結果的準確性容易受人為因素影響,現(xiàn)上普遍采用自動定氮儀檢測蛋白質(zhì)。同凱氏法相比自動定氮儀具有自動、省時、準確的優(yōu)點。凱氏定氮法與自動定氮法的原理一樣,不同在處在于前者使用經(jīng)典凱氏定氮燒瓶及定氮蒸餾裝置進行樣品消化和蒸餾,手工滴定計算結果;而后者利用消化器和氮含量測定自動儀器獨立進行計算。為了更好的推廣此技術,更好與接軌,本文對此檢測技術的精密度、準確度、不確定度進行了綜合的考查和評價。
檢測方法: 凱氏定氮法:按GB/T 5009.5-2003 規(guī)定執(zhí)行。自動定氮儀檢測法:采用福斯特卡托(FOSSTECATOR)公司提供的基爾特克(KJELTEC)凱氏系統(tǒng)進行自動定氮。儀器型號2300 型自動定氮儀。結果與分析、 與凱氏定氮法的檢測結果的比較采用凱氏定氮法及自動定氮儀對燕麥粉、豬肉松進行多次重復檢測,結果表明,前后兩法檢測結果基本一致,精密度均達到國標GB/T 5009.5-2003 要求,檢測結果差值均超過算術平均值的10%,自動定氮儀的準確度、氮的損失稱取0.2~0.5g硫酸亞鐵銨[(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O]和0.67g 蔗糖于消化管中,按樣品準備步驟加入所有試劑進行消化蒸餾、滴定計算氮回收率。其回收率在99%以上。燕麥粉蛋白質(zhì)含量的測定自動定氮儀測量的不確定性分析按照2300 自動定氮儀提供的方法對魚粉蛋白質(zhì)含量重復測量10 次,結果見表4,得魚粉平均蛋白質(zhì)含量為64%。根據(jù)樣品蛋白質(zhì)百分含量X%測量不確定度的數(shù)學模型:U(X%)=f{m 樣,V(HCl-2), V(HCl-0),C(HCl), M(N)}討論凱氏定氮法檢測周期長,樣品消化時間需120~180min,甚至更長;而自動定氮儀檢測樣品消化采用模塊式消化爐,一次可消化20 個樣品,消化溫度高,消化時間只需30~60min。蛋白質(zhì)自動定氮儀通過消化裝置控制消化條件,避免因酸大量流失而導致氮的損失,且用酸量只是凱氏定氮法的1/2,大大提高氮的回收率。自動定氮儀檢測方法的精密度、準確度、不確定度達到高要求,確保檢測結果的準確性和可靠性。綜上分析,采用自動定氮儀對食品、動物飼料中的蛋白質(zhì)含量測定是快速、準確的檢定方法,同時可大大縮短檢測周期提高檢測效率.